| 吴姝雯.不同频率电针介导PINK1/Parkin通路治疗STC大鼠的实验研究[J].浙江中西医结合杂志,2023,33(2): |
| 不同频率电针介导PINK1/Parkin通路治疗STC大鼠的实验研究 |
| PINK1/Parkin通路介导STC大鼠模型中ICC线粒体自噬及不同梯度电针的干预效应 |
| 投稿时间：2022-05-24 修订日期：2023-01-13 |
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| 中文关键词: 关键词：线粒体自噬相关蛋白 帕金蛋白 慢传输型便秘 Cajal间质细胞 电针 |
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| 中文摘要: |
| 摘要 目的：探讨线粒体自噬相关蛋白（PINK1）/帕金蛋白（Parkin）通路对慢传输型便秘（STC）大鼠模型结肠Cajal间质细胞（ICC）线粒体自噬的影响及不同梯度电针的干预效应。方法：取34只8周龄雄性健康SD大鼠，采用随机数字表分为正常对照组（7只）和建模组（27只）。建模组采用洛哌丁胺混悬液灌胃法制备STC大鼠模型，并于验证建模成功后采用随机数字表分为模型对照组、低频电针组、高频电针组、假电针组。低频电针组予以电子针疗仪频率2Hz、强度10mA刺激“后三里”，高频电针组予以电子针疗仪频率50Hz、强度10mA刺激“后三里”，假电针组针刺“后三里”但不通电，模型对照组和正常对照组仅固定处理，每天30min，1次/d，持续14d。碳素墨汁灌胃法检测肠道推进率；苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理改变；免疫荧光共聚焦显微镜观察ICC形态、透射电镜观察超微结构；实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测结肠组织C-Kit、PINK1、Parkin、自噬效应蛋白1（Beclin1）、p62、自噬相关蛋白3（LC3）信使核糖核酸（mRNA）的表达；免疫组化及蛋白质免疫印迹（WB）法检测结肠组织C-kit、PINK1、Parkin、Beclin1、p62、LC3蛋白表达。结果：STC大鼠模型构建成功且干预期间均无死亡；与正常对照组比较，其余4组肠道推进率，ICC数量、免疫荧光积分光密度（IOD）值，C-kit、p62 mRNA及蛋白表达均下降（P＜0.05）；与模型对照组和假电针组比较，低频电针组、高频电针组肠道推进率，ICC数量、免疫荧光IOD值，C-kit、p62 mRNA及蛋白表达均升高（P＜0.05）；与低频电针组比较，高频电针组肠道推进率，ICC数量、免疫荧光IOD值，C-kit、p62 mRNA及蛋白表达均升高（P＜0.05）；与正常对照组比较，其余4组PINK1、Parkin、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达均升高（P＜0.05）；与模型对照组和假电针组比较，低频电针组和高频电针组PINK1、Parkin、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达均下降（P＜0.05）；与低频电针组比较，高频电针组PINK1、Parkin、Beclin1、LC3 mRNA及蛋白表达均下降（P＜0.05）；正常对照组大鼠结肠组织、ICC形态及超微结构均正常，模型对照组和假电针组均呈显著改变，低频电针组和高频电针组均改善，且高频电针组基本接近正常对照组。结论：电针“后三里”能够减轻STC大鼠结肠模型病理改变和ICC形态学改变，减少ICC线粒体自噬，推测与下调PINK1、Parkin、Beclin1、LC3表达，上调C-kit、p62表达有关。 |
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