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吴志强.三叶青总黄酮克服吉非替尼耐药的体外研究[J].浙江中西医结合杂志,2023,33(3):
三叶青总黄酮克服吉非替尼耐药的体外研究
Experimental study of Trifolium Flavonoids on the reversal of gefitinib resistance in non-small lung cancer cell line
投稿时间:2022-05-30  修订日期:2022-09-02
DOI:
中文关键词:  非小细胞肺癌  耐药  三叶青总黄酮  EGFR信号通路
英文关键词:
基金项目:金华市科技计划项目社会发展类重点项目(2021-3-093);金华市中心医院中青年科研启动基金(JY2019-1-01)
作者单位E-mail
吴志强* 金华市中心医院 775092115@qq.com 
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中文摘要:
      目的 观察三叶青总黄酮联合表皮生长因子-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼对人肺癌细胞株PC9 /R(PC9细胞的获得性吉非替尼EGFR-TKI耐药株)增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 提取并使用高效液相色谱(HPLC)分析所提取的三叶青总黄酮,检测波长为254和330nM。将PC9 /R细胞分为对照组( CK组) 、吉非替尼组(G组) 、三叶青总黄酮组( TF组)、吉非替尼联合三叶青总黄酮组( G+TF组),运用MTT法检测不同浓度三叶青总黄酮、吉非替尼对PC9/R细胞增殖情况以及两药联用效果。G+TF组分别加入吉非替尼 17 μmol /L、三叶青总黄酮分为20或30μg/mL、吉非替尼 17μmol /L +三叶青总黄酮 20或30μg/mL,CK组不加药物,于给药24h后流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。采用Western blotting法检测各组细胞中EGFR信号通路及其旁路HGF/MET/PI3K/AKT通路蛋白的表达。结果 三叶青50%乙醇洗脱部位比三叶青药材总黄铜提取物在254nm和330nm波长下具有较好的吸收峰;MTT实验结果显示,三叶青总黄酮增强PC-9R对吉非替尼的敏感性;流式细胞术实验结果显示,联合组早期细胞凋亡比例分别高于G组、TF组;Western blot检测结果表明,联合组EGFR、p-EGFR、AKT、p-AKT、p-PI3K、STAT3、p-STAT3、MET和p-MET蛋白的表达量分别低于G组、TF组。结论 三叶青总黄酮联合吉非替尼可抑制EGFR-TKI耐药的非小细胞肺癌细胞增殖并促进其凋亡,作用机制可能与抑制EGFR信号通路及其旁路
英文摘要:
      Non-small cell lung cancer; Drug resistance; Trifolium Flavonoids; EGFR signaling pathway
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