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贺倩倩,杨晓红,曹毅.基于ERK信号通路研究补阳还五汤促糖尿病足溃疡愈合作用的机制[J].浙江中西医结合杂志,2023,33(11):
基于ERK信号通路研究补阳还五汤促糖尿病足溃疡愈合作用的机制
Abstract:The Experimental Research based on ERK signaling pathway of Buyanghuanwu Decoction promoting diabetic foot ulcer healing
投稿时间:2022-12-05  修订日期:2023-07-07
DOI:
中文关键词:  补阳还五汤,HaCaT细胞,p-ERK1/2,糖尿病足溃疡
英文关键词:BuyangHuanwu Tang, HaCaT cells, p-ERK1/2,Diabetic foot ulcers
基金项目:浙江省中医药科学研究(2021ZB102)
作者单位E-mail
贺倩倩 杭州市富阳区中医院 827675725@qq.com 
杨晓红 浙江中医药大学附属第一医院  
曹毅* 浙江中医药大学附属第一医院 caoyi1965@163.com 
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中文摘要:
      :[目的]基于细胞外调节激酶(ERK)信号通路研究补阳还五汤对人永生化表皮细胞(HaCaT)增殖和迁移的作用[方法] Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测不同浓度补阳还五汤(0,5,10,15,25,50mg/mL)对HaCaT细胞增殖的影响和适宜浓度补阳还五汤联合ERK抑制剂(U0126)作用下HaCaT细胞增殖的情况;划痕实验检测HaCaT细胞的迁移情况;蛋白质印迹法(Western blot)法检测不同浓度补阳还五汤以及ERK抑制剂(U0126)作用下HaCaT细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达水平。[结果] 1.与空白组(1.0514±0.080)比较,5、10、15、25、50mg/mL补阳还五汤细胞的吸光度值分别为(1.1704±0.076)、(1.2642±0.078)、( 1.3845±0.060)、(1.6996±0.080)、( 1.7211±0.088),且25mg/mL(1.6996±0.080)时促增殖效果最佳(P<0.05);2.与空白组对比,5、15、25 mg/mL浓度补阳还五汤浓度依赖性促进HaCaT细胞p-ERK1/2的表达[(0.545±0.005)、(1.038±0.126)、(2.414±0.456)比(0.260±0.092),P<0.05]3.与ERK抑制剂(U0126)组对比,25mg/mL补阳还五汤能明显促进ERK抑制剂(U0126)作用下的HaCaT细胞的增殖[(1.3167±0.088)比(1.0474±0.056)](P<0.01)4.补阳还五汤能促进HaCaT细胞的迁移[在12h时迁移率比为(0.55±0.061)比(0.43±0.017),(P<0.05);24h时迁移率比为(0.84±0.035)比(0.58±0.059),(P<0.01)]。5.Western blot的结果显示,补阳还五汤呈浓度依赖性促进HaCaT细胞p-ERK1/2蛋白的表达[与空白组对比,5、15、25 mg/mL浓度补阳还五汤p-ERK1/2蛋白的表达量分别为(0.545±0.005)、(1.038±0.126)、(2.414±0.456)比(0.260±0.092),P<0.05];与ERK抑制剂组比较,补阳还五汤组同时促进ERK抑制剂(U0126)作用下p-ERK1/2蛋白的表达[(0.855±0.008)比(0.356±0.108)](P<0.01)。[结论]补阳还五汤可能通过激活ERK信号通路促进HaCaT细胞增殖、迁移,促进糖尿病足溃疡的愈合。
英文摘要:
      
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