| 丁旭阳,刘喜德,刘敏,叶丽红,蔡龙,王珊珊.温化蠲痹方对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞微小 RNA-146a调控DNA甲基化的作用研究[J].浙江中西医结合杂志,2025,35(4): |
| 温化蠲痹方对类风湿关节炎患者外周血单个核细胞微小 RNA-146a调控DNA甲基化的作用研究 |
| Study on the Effect of Wenhua Juanbi Formula on the Regulation of DNA Methylation by MicroRNA-146a in Peripheral Blood Mononuclear Cells of Patients with Rheumatoid Arthritis. |
| 投稿时间：2024-11-23 修订日期：2025-02-08 |
| DOI： |
| 中文关键词: 类风湿关节炎 温化蠲痹方 DNA甲基化 miRNA-146a |
| 英文关键词:Wenhua Juanbi Recipe rheumatoid arthritis miRNA-146a DNA methylation |
| 基金项目:浙江省自然科学基金(No.LY21H270001, LQ23H270014)；浙江省中医药科技计划项目(No.2020ZB180)；杭州市卫生科技计划重大项目(No.Z20200026) |
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| 中文摘要: |
| 目的 本研究的主要目标是探讨温化蠲痹方对活动期类风湿关节炎患者外周血单核细胞（PBMCs）中微小RNA-146a（miRNA-146a）和DNA甲基化转移酶（DNMTs）的表达影响。我们假设温化蠲痹方能够通过调节miRNA-146a的表达，进一步通过影响DNA甲基化状态，调控免疫反应，从而改善RA的临床症状和病理进展。方法 本研究选取了9例活动期RA患者和9名健康对照者，所有患者均符合ACR/EULAR标准并处于活动期RA。采用随机数字表法分为三组：RA组、RA转染反义miRNA-146a组、RA加中药组，每组3例。同时，选取9名健康受试者，健康对照者年龄和性别与RA患者匹配，按照相同标准分为三组：正常组、正常转染miRNA-146a组、正常转染miRNA-146a加中药组，每组3名。实验步骤包括提取PBMCs并进行体外培养、转染及干预；使用Trizol法提取总RNA，并通过荧光定量PCR（qPCR）检测miRNA-146a及DNA甲基转移酶（DNMT1、DNMT3a、DNMT3b）的表达情况，分析温化蠲痹方对这些分子的调控作用。结果 与正常组相比，活动期RA组和正常转染miRNA-146a组患者PBMCs中miRNA-146a的表达显著升高（分别为1.44±0.49 比 0.24±0.19，0.81±0.29 比 0.24±0.19，P<0.05）；DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达显著降低（分别为1.77±0.99 比 2.75±0.12，1.58±0.95 比 2.48±0.87，1.65±0.84 比 2.64±0.79，P<0.05）。与活动期RA组相比，RA转染反义miRNA-146a组和RA联合中药组PBMCs中miRNA-146a的表达明显下降（分别为0.31±0.16 比 1.44±0.49，0.83±0.61 比 1.44±0.49，P<0.05）；DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达显著升高（分别为2.46±0.91 比 1.77±0.99，2.17±0.59 比 1.58±0.95，2.28±0.52 比 1.65±0.84，P<0.05）。与正常转染miRNA-146a组相比，正常转染miRNA-146a联合中药组PBMCs中miRNA-146a的表达显著降低（0.34±0.17 比 0.81±0.29，P<0.05）；DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达显著升高（分别为2.31±0.63 比 1.98±0.76，2.17±0.52 比 1.90±0.56，2.24±0.42 比 1.95±0.82，P<0.05）。结论 本研究表明，miRNA-146a可能通过调控DNA甲基化对RA的免疫和炎症反应产生影响。温化蠲痹方通过下调miRNA-146a并上调DNMTs的表达，有助于恢复正常的DNA甲基化状态，从而抑制免疫和炎症异常反应，改善RA的临床症状及病理变化，显示出增效作用。 |
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